在小鼠喉部肌肉注射逆行示踪病毒，在脑干Kölliker-Fuse(KF)核、旁巨细胞网状核、中间网状核（IRt）、preBötC、孤束核（NTS）、Ram等核团发现逆行投射纤维。雄性小鼠在与雌性小鼠接触后迅速进行超声波发声，免疫荧光实验发现在发声行为过程中Ram核团神经元激活最为显著。进一步通过CANE技术标记发声行为激活的Ram核团神经元（Ram-voc），该类神经元群并不表达胆碱乙酰转移酶（一种运动神经元的标志物），广泛表达囊泡谷氨酸转运体Vglut2,表明Ram核团输入到喉部肌肉主要是兴奋性神经元。

在不影响正常呼吸的情况下，通过病毒抑制RAm-VOC神经元突触的输入后雄性小鼠在遇见雌性小鼠后并不能发声。在夹尾和足底电击小鼠后均能引起吱吱的声音，在抑制RAm-VOC神经元活性后可阻断上述负性刺激的发声行为。通过病毒抑制PAG投射到RAm神经元后也可阻断小鼠的发声行为。

图1：Ram核团输入到喉部肌肉主要是兴奋性神经元

RAm-VOC神经元是否介导吸气引起的周期性的抑制发声？逆行病毒示踪结果显示臂旁核、PAG、KF等脑区是RAm-VOC神经元主要兴奋性输入，呼吸中枢preBötC是主要的抑制性输入。研究人员认为可能PAG—RAm-VOC兴奋性输入诱导声带内收，而这种诱导作用可被preBötC-RAm-VOC抑制性输入进行节律性抑制调控。通过病毒策略特异性去抑制RAm-VOC兴奋性神经元后吸气引起的发声中断行为严重受损，即表明RAm-VOC抑制性输入调控吸气引起的抑制发声行为。

图3：RAm-VOC神经元抑制性输入调控吸气抑制发声

本文揭示了调控发声和呼吸相互作用的神经元群：RAm-VOC兴奋性输入诱导声带内收，促进发声行为，同时伴随呼气；RAm-VOC抑制性输入调控吸气抑制发声。